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2014年6月 ;1 (1) 文章 开放获取

AQP4自身抗体检测在临床实验室服务的表现

摩根大通(J.P.油炸锅,退役军人列侬,中华民国Pittock,克里詹金斯,p . Fallier-Becker,S.L. Clardy,e·奥尔塔,电子艺界Jedynak,多严峻Lucchinetti,电子艺界•舒斯特,人Weinshenker,D.M. Wingerchuk,a .麦肯
第一次出版2014年5月22日 DOI: https://doi.org/10.1212/NXI.0000000000000011
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摘要目的:比较性能的当代aquaporin-4-immunoglobulin (Ig) G化验在临床服务。

方法:从神经病人血清(4组)和控制测试最初由服务ELISA(重组人类aquaporin-4 M1同种型),然后通过细胞荧光化验:固定(CBA、M1-aquaporin-4 observer-scored)和生活(fluorescence-activated细胞排序(流式细胞仪)、M1和M23 aquaporin-4亚型)。组1:从2012年1月至5月梅奥诊所的病人测试;组2:连续aquaporin-4-IgG-positive患者从2011年9月(梅奥和non-Mayo);组3:疑似ELISA假阴性则从2011年到2013年(physician-reported,视neuromyelitis谱系障碍的可能性高[NMOSDs]临床上);第四组:疑似ELISA阳性(physician-reported,不是NMOSD临床)。

结果:第1组(n = 388): M1-FACS试验进行优化(曲线下面积:M1 = 0.64;M23 = 0.57 (p= 0.02])。第二组(n = 30): NMOSD证实了临床诊断:M23-FACS, 24;M1-FACS 23;M1-CBA 20;M1-ELISA, 18岁。六个疑似假阳性结果:M23-FACS 2;M1-ELISA 2;和M23-FACS M1-FACS M1-CBA, 2。3组(n = 31日疑似M1-ELISA误报警):结果阳性5血清:M1-FACS, 5;M23-FACS 3; and M1-CBA, 2. Group 4 (n = 41, suspected M1-ELISA false-positives): all negative except 1 (positive only by M1-CBA). M1/M23-cotransfected cells expressing smaller membrane arrays of aquaporin-4 yielded fewer false- positive FACS results than M23-transfected cells.

结论:Aquaporin-4-transfected cba,尤其是M1-FACS,在协助执行最佳NMOSD血清学诊断。高阶M23-aquaporin-4可能产生假阳性结果的数组绑定免疫球蛋白g是非。

术语表

AcGFP=
Aequorea coerulescens绿色荧光蛋白;
安娜=
抗核抗体;
AQP4=
aquaporin-4;
BSA=
牛血清白蛋白;
CBA=
细胞试验;
CI=
置信区间;
乙二胺四乙酸=
乙二胺四乙酸;
流式细胞仪=
fluorescence-activated细胞分类;
HEK=
人类胚胎肾;
搞笑=
免疫球蛋白;
小额信贷机构=
平均荧光强度;
女士=
多发性硬化症;
NMOSD=
视neuromyelitis谱系障碍;
在=
视神经炎;
美国公共电视台=
磷酸盐;
中华民国=
接受者操作特性;
TM=
横向脊髓炎

视neuromyelitis谱系障碍(NMOSDs)的诊断依赖于准确测定aquaporin-4 (AQP4)免疫球蛋白G自身抗体(Ig)状态。NMOSDs包括复发或双边视神经炎(上),复发纵向广泛的横向脊髓炎(TM)和脑病包括circumventricular器官。1,2AQP4-IgG血清阳性NMOSD有别于多发性硬化症(MS)。这些疾病在发病机理不同,临床课程,建议,治疗和预后。3,4检测AQP4-IgG在第一或TM袭击证明考虑长期免疫抑制。5,6假阳性血清学可能不利于病人护理。

第一代AQP4-IgG分析组织的免疫荧光,低敏感性(48% - -54%),但高特异性NMOSD诊断。5,7国际共识认为化验使用重组AQP4抗原比组织的分析更敏感。5,8,- - - - - -,1199% - -100%的特异性重组人类已报告AQP4 ELISA和转染细胞化验(cba)。5,8,- - - - - -,10我们的经验显示阳性结果的实例的病人不能满足NMOSD临床标准。

测定方法的影响性能。细胞转染与M23-AQP4同种型已报告是一个比M1-AQP4-transfected细胞基质NMOSD诊断更加敏感。10M23同种型缺乏M1-AQP4 22 n端残留。12M23-AQP4是公认的超微结构存在于星形胶质细胞的质膜13和转染细胞作为粒子的正交阵列,当M1-AQP4 coexpressed有限大小。14,15

这份报告描述了我们2011 - 2013年临床服务实验室经验M1-ELISA并行执行与AQP4-transfected cba (observer-scored免疫荧光显微镜和fluorescence-activated细胞排序(流式细胞仪))。我们也调查的影响使转染细胞M1和M23流式细胞仪性能的混合物。

方法

标准协议的审批、登记和病人同意。

本研究得到梅奥诊所的机构审查委员会的批准。

控制对象。

我们评估5组血清(总共338例)。疾病控制两个组:158年non-NMOSD脱髓鞘疾病和19与系统性红斑狼疮或干燥综合征神经受累。其余3血清组已经提交的一般医疗诊所日常化学或血清学分析(没有可用的历史):40没有生化异常,100年21 hypergammaglobulinemia,抗核抗体(ANA)阳性。

病人的鉴别诊断包括NMOSD。

我们调查共有1075名患者的血清提交M1-ELISA测试过程中神经系统评估。临床信息对所有组1可用的病人以及血清反应阳性的患者组2 - 4。AQP4-IgG测试结果进行了分析,参照physician-assigned预备调查诊断。

组1。

组1由连续的梅奥诊所的病人测试从1月1日至5月31日,2012名(n = 388)要么(1)临床定义动(会议Wingerchuk 2006标准,16排除AQP4-IgG血清阳性),(2)潜在的第一次演讲NMOSD(单相或复发性的攻击;单相或复发性攻击的TM只有纵向广泛或短段病变),或(3)另一种神经诊断。动或NMOSD 50个病人的诊断疑似进行预测:动(12);(10;单相单边,7;单相双边、2;复发,1);TM (28;单相,21岁;复发,7)。其他神经诊断被认为更有可能预先测试剩余的338名患者。

组2。

组2由连续的血清反应阳性的梅奥诊所和non-Mayo诊所病人(n = 30)在2011年9月提交AQP4-IgG测试血清615份。

组3和4。

组3和4是在1或2组患者没有来到我们的注意力通过临床服务实验室协商由神经学家(2011 - 2013)。组3由潜在的误报警:31 M1-ELISA-negative病人临床NMOSD怀疑为谁高。组4由潜在的片面性:41 M1-ELISA-positive NMOSD病人缺乏临床证据。

统计分析。

敏感性和特异性测定每个试验通过引用为第1组患者进行预测诊断。McNemar检验法或精确的二项测试使用了适当的比较interassay敏感性和特异性差异(JMP version 9.0和SAS 9.2版本[卡里SAS研究所数控])。接受者操作特征(ROC)曲线并没有为M1-ELISA生成或M1-CBA数据由于低变异性。从ROC曲线生成的流式细胞仪的结果,我们为M1曲线下面积相比,M23流式细胞仪对机会(0.50)和另一个结果。阳性似然比嵌入式图像 和置信区间(CIs)计算为1和2组患者的总和。SAS version 9, JMP version 9,或R软件被用于所有的分析。17p值< 0.05被认为是具有统计学意义。

化验。

质量保证,化验重复至少一次对所有血清产生积极的结果。所有测试进行盲法临床数据。

活细胞(流式细胞仪)检测。

人类胚胎肾(HEK293)细胞转染使用Effectene(每生产指令;试剂盒,瓦伦西亚,CA) 3 (pIRES2µg质粒DNAAequorea coerulescens绿色荧光蛋白(AcGFP) /人类AQP4;M1或者M23,或在1:1的比例)。M23-AQP4 cotransfection研究与安全域表达转染标记(pIRES2-DsRed / M23-AQP4)。细胞培养为一个额外的36小时posttransfection和解除暴露0.25%胰蛋白酶/乙二胺四乙酸(EDTA;表达载体,卡尔斯巴德,CA)在室温下2分钟。后续步骤4°C。洗细胞悬浮在含有叠氮化钠0.02%,磷酸盐(PBS) pH值7.2,0.5%牛血清白蛋白(BSA), 2毫米EDTA和Fc受体阻断剂(Miltenyi研究,赤褐色,CA);旋转10分钟;在PBS稀释(包含2% BSA, 10%正常山羊血清,15毫米EDTA,叠氮化钠和0.05%);和分发到96好圆底板块(1×105细胞/;正欲/猎鹰,富兰克林湖,NJ)。血清是heat-inactivated(35分钟56°C),在PBS稀释(包含2% BSA, 10%正常山羊血清,15毫米EDTA,叠氮化钠和0.05%),并将其添加到复制井在1:5稀释。摇晃后板(30分钟,300 rpm),细胞与PBS洗3次。山羊反人类免疫球蛋白(γ重型和轻型chain-specific Alexafluor 647 -共轭)添加在1:50 0(包含2% BSA在PBS稀释,正常山羊血清,10% EDTA 15毫米,叠氮化钠和0.05%)。摇晃后(30分钟,4°C),细胞与PBS洗3次,固定在4%多聚甲醛(电子显微镜科学,哈特菲尔德,PA),并分析了通过流式细胞分析仪(LSR II,正欲)。两个种群的GFP表达的基础上:积极的(高AQP4表达)和负(低或没有AQP4表达)。Alexafluor中位数647荧光强度(MFI) GFP-positive人口表示相对丰富的人类免疫球蛋白g可能绑定到AQP4表面抗原表位;MFI GFP-negative人口表示nonspecifically-bound免疫球蛋白。免疫球蛋白结合指数计算的比率平均MFI重复整除的每个细胞群:嵌入式图像 免疫球蛋白结合指数的平均值(+ 2 SDs) 338年控制受试者的血清M23-FACS M1-FACS是1.50和2.50。我们建立了保守截止免疫球蛋白结合索引值:2.00为M23-FACS M1-FACS和3.00。

16个血清,取得了积极成果M23-FACS(14个病人没有NMOSD诊断,2 NMOSD诊断)被M1-FACS进一步分析,通过流式细胞仪使用HEK293细胞转染M23-AQP4单独或双重转染M1-AQP4和M23-AQP4。

ELISA和固定细胞化验。

商业套件化验(M1-AQP4抗原)用于ELISA (RSR有限、卡迪夫、英国)和固定permeabilized CBA (observer-scored免疫荧光;Euroimmun,吕贝克,德国)。5M1-ELISA研究结果报道在任意单位(正值= 5 U /毫升或更高版本,每制造商)。CBA结果报道看作是积极的还是消极的。进行初步的比较Euroimmun M1-CBA和M23-CBA 60名患者。M1-CBA被选为所有其他测试,因为较高的背景M23-CBA受阻的解释一些血清。

冷冻断裂和免疫印迹分析膜M1和M23重组AQP4蛋白。

等离子体膜的转染HEK293细胞被冷冻断裂电镜检查。18短暂,细胞被固定为2.5%戊二醛在0.1甲次砷酸盐缓冲,速冻在氮泥浆(−210°C),和骨折(BAF400D、鲍尔泽、列支敦士登)。副本是通过跟踪样品platin和碳消化残余细胞材料紧随其后。

免疫印迹,HEK293细胞转染pIRES2-AcGFP /人类M1-AQP4 pIRES2-DsRed /人类M23-AQP4,或两者兼而有之(1:1比例)在4°C细胞溶解NativePAGE示例包含0.75% dodecyl-β-缓冲(表达载体)d-maltoside。清理碎片后离心(20000克,10分钟,4°C),等量的蛋白质(由bicinchoninic酸分析)和0.5% Coomassie蓝g - 250(4:1比例)加载前3% - -12% Bis-Tris凝胶。NativeMark分子尺寸标准。电泳(根据制造商的指示)后,凝胶在0.1%十二烷基硫酸钠浸泡10分钟。分开,最低限度变性蛋白质被转移到聚偏二氟乙烯膜固定在8%醋酸。与甲醇g - 250染色了。膜被封锁的1小时10%的脱脂奶粉缓冲区(20毫米三羟甲基氨基甲烷、液pH值7.6,137毫米氯化钠,0.1%渐变20)和探索人类AQP4 C-terminus-specific老鼠单克隆免疫球蛋白(MCM5,产生内部,下稀释)。19三5分钟后洗(20毫米三羟甲基氨基甲烷,液pH值7.6,137毫米氯化钠,Tween-20 0.1%),细胞膜受到辣根peroxidase-conjugated山羊anti-mouse免疫球蛋白30分钟(搅拌),再次清洗。结合免疫球蛋白是由增强化学发光检测autoradiographically(皮尔斯,罗克福德,IL)。

结果

控制对象。

所有338名对照组被M1-ELISA和M1-CBA负面。四个≥1流式细胞仪测定血清产生积极的结果:2 hypergammaglobulinemia集团(M23-FACS试验;免疫球蛋白结合指数6.86和4.96)和2 ANA-positive non-organ-specific自体免疫组(M23-FACS;免疫球蛋白结合指数4.99和4.30;1被M1-FACS也积极;免疫球蛋白结合指数2.74)。

神经系统疾病患者。

图1说明了流式细胞仪控制策略。图e 1在首页Neurology.org/nn说明了流式细胞仪的分布值。积极的结果产生了患者的血清和没有NMOSD诊断所示表1和2。多个化验了积极性除了6 45 NMOSDs患者(表1)。单个试验取得了积极除了3 65名患者没有NMOSDs (表2)。

图1
图1 例子说明控制策略fluorescence-activated细胞排序(流式细胞仪)

例子包括(从左到右)从患者血清neuromyelitis视谱系障碍(NMOSD)产生积极性M1-FACS和M23-FACS,从多发性硬化(MS)患者血清产生积极性M23-FACS只有,和消极的从患者血清女士GFP =绿色荧光蛋白;pos =积极;流行=人口。

把这个表:
表1

阳性结果的频率和分布产生了由不同AQP4-IgG化验患者临床NMOSD诊断

把这个表:
表2

阳性结果的频率和分布产生了由不同AQP4-IgG化验NMOSD诊断的患者缺乏临床证据

组1(连续的梅奥诊所的病人测试/ 5个月)。

34 388血清测试,取得了积极成果。16个血清反应阳性的患者一个NMOSD诊断:动,10;TM 4(3复发,2纵向广泛MRI病灶);,2(两个单一攻击,1两国)。AQP4-IgG检测到:M1-FACS 14(中值40.9;范围-138 - 2.77);M23-FACS 13(中值42.1;范围10.4 - -85.0);M1-CBA 13和M1-ELISA 12(中值70.7;范围5.2 - > 160 U /毫升)。

剩下的18个血清产生积极结果的病人没有一个NMOSD诊断(表e 1)。AQP4-IgG被发现:M23-FACS只有15(中值4.04;范围3.01 - -9.74)和M1-ELISA, 3(中位数5.4;范围5.20 - -46.4 U /毫升)。

动,定义的临床试验敏感性如下(表依照):M1-FACS, 83%;M23-FACS 75%;M1-CBA, 75%;和M1-ELISA, 58%(差异不显著M1-FACS其他的比较分析,p> 0.05,McNemar检验法测试)。测定特异性动诊断如下:M1-FACS, 100%;M1-CBA, 100%;M1-ELISA, 99%;M23-FACS, 95%。M23-FACS比M1-FACS(不具体p< 0.001,精确二项检验),M1-CBA (p< 0.001,精确二项检验),和M1-ELISA (p= 0.004,McNemar检验法测试)。ROC分析,流式细胞仪分析使用数据全部50个NMOSD-compatible患者临床表现(动,,或TM)显示明显M1-FACS较大曲线下的面积比M23-FACS (0.64) (0.57),p= 0.02(图飞行)。

组2 (AQP4-IgG seropositives梅奥和non-Mayo测试超过1个月)。

三十血清615测试中取得了积极成果。NMOSD-compatible的24例临床诊断、AQP4-IgG检测到:M23-FACS 24(免疫球蛋白中值绑定指数24.9;范围4.84 - -52.8);M1-FACS在23个(免疫球蛋白中值绑定指数40.5;范围3.73 - -88.3);M1-CBA 20;和M1-ELISA 18(中值40.4;范围8.5 - > 160 U /毫升)。

六个血清产生一个积极的结果从病人不被认为有一个NMOSD诊断。然而,2患者积极3化验(M1-CBA、M1-FACS M23-FACS)安装扩展NMOSD频谱。都是女性,自身免疫性脑炎。人共存干燥综合症和MRI MS-atypical大脑病变的证据。其他光学chiasmitis和转移性乳腺癌的历史(没有脑转移),符合多种NMOSD。20.两人(1经典女士,原因不明的其他脊髓病)是积极的只有M23-FACS(免疫球蛋白结合指数3.97和4.95),而另一个2(1肌筋膜疼痛症,其他经典MS)是积极的只有M1-ELISA(值5.2和107 U /毫升)。积极的可能性比率产生的4组1和2的分析结合(CIs)如下:M1-FACS, 65.9 (16.7 - -267.9);M1-CBA, 54.8 (13.4 -224);M1-ELISA 18.8 (7.5 47-3);M23-FACS, 6.6 (3.9 - -10.8)。

组3(潜在错误的血清反应阴性的患者)。

患者血清从31 NMOSD-compatible M1-ELISA演讲产生了消极的结果。五个被M1-FACS积极(免疫球蛋白结合中值指数4.8;范围2.77 - -6.53);3 5也积极通过M23-FACS(中位数10.4;范围6.60 - -12.1),和2也积极通过M1-CBA(表e - 3)。消极的化验,其余26日seronegatives被认为可能是真的。

组4(潜在错误的血清反应阳性的患者)。

21788个病人测试,1261年产生了积极M1-ELISA结果。医生照顾这些通知我们,他们怀疑假阳性结果的41,因为临床表现没有NMOSD-compatible;他们中间M1-ELISA值18.6国际单位/毫升(范围5.10 - > 160国际单位/毫升)(表)的军医。只有其中一个41血清产生一个积极的结果当测试的3 CBA (M1 CBA)。病人opticospinal没有客观的临床和放射异常症状。其余40被判定为阳性。

分析M1和M23 AQP4蛋白转染HEK293细胞的特征。

分析不同抗原基质用于生活cba(即。,HEK293cells transfected with M1 or M23 AQP4 isoform), we compared plasma membrane preparations by freeze-fracture electron microscopy, native gel electrophoresis/Western blot, and flow cytometry. Freeze-fracture images revealed singlet particles in plasma membranes of M1-AQP4 cells and large orthogonal array-like assemblies in M23-AQP4 cells (图2一个)。分析等离子体膜蛋白的可溶性细胞转染M1-AQP4或M23-AQP4独自或与AQP4亚型(不同的比率),通过使用AQP4-specific单克隆抗体免疫印迹证实,AQP4在高阶议会的比例成正比的转染率M23: M1互补脱氧核糖核酸(图2 b)。

图2
图2 M1和M23 AQP4亚型相比,冷冻断裂电子显微镜和免疫印迹分析

(A)等离子体膜HEK293细胞表达重组M1-AQP4或M23-AQP4被冷冻断裂电子显微镜。(B)的免疫印迹分析比例的高阶数组或重组AQP4表达它们是四聚体仅在HEK293细胞转染质粒编码M23(巷1),M1(5道),或不同比例(通道2 - 4)。膜内的粒子在M1-AQP4细胞主要是单线态(左一)。比较大的晶格M23-AQP4正交数组类组件的细胞(A,对吧)。M23-AQP4 M1-AQP4 coexpression抑制高阶阵列形成的(B), y轴表示分子量(kDa) AQP4结构。可溶性蛋白质,由蓝色本机凝胶电泳和转移到PDF膜,探讨了单克隆AQP4-specific免疫球蛋白。AQP4免疫反应性在largest-sized数组(巷1)减少与增加M1: M23比率,四聚物的形式和比例增加(巷5)。AQP4 = aquaporin-4;Ig =免疫球蛋白;HEK =人类胚胎肾。

我们下一个测试血清来自16个病人(2与动,14没有NMOSD)通过流式细胞仪检测,采用基质细胞单独转染与M1-AQP4 M23-AQP4或cotransfected M1-AQP4和M23-AQP4(1:1比例)。所有基板2控制动血清产生相似的结果(图3)。为14 non-NMOSD控制血清免疫球蛋白结合指数小于2.00 M1 single-transfected细胞;M23 single-transfected细胞免疫球蛋白中值绑定指数6.8(范围2.98 - -25.8)和M1 / M23 cotransfected细胞中位数为3.3(范围1.98 - -14.7)。

图3
图3 Fluorescence-activated细胞单独排序(流式细胞仪)采用细胞转染与M1-AQP4或M23-AQP4 cotransfected与AQP4亚型

流式细胞仪显示非特异性结合的控制病人的血清免疫球蛋白g住HEK293细胞表达M23-AQP4,当M1-AQP4 coexpressed减少。患者的血清免疫球蛋白g 2积极控制neuromyelitis视(动)绑定到所有AQP4-transfected细胞但结合更热切的细胞表达M23-AQP4或M23和M1(1:1比例)比单独细胞表达M1。血清免疫球蛋白绑定指数14控制缺乏NMOSD M1 single-transfected细胞都小于2.00;M23 single-transfected细胞免疫球蛋白中值绑定指数6.8(范围2.98 - -25.8)和M1 / M23 cotransfected细胞中位数为3.3(范围1.98 - -14.7)。水平灰线表明截止M23-FACS积极性(3.00)。AQP4 = aquaporin-4;Ig =免疫球蛋白;HEK =人类胚胎肾;NMOSD =动谱系障碍。

讨论

这项研究促使我们的遭遇,通过医生协商,几个疑似假阳性和假阴性检测结果在临床验证酶联免疫试剂盒。我们比较了ELISA 3替代AQP4-transfected cba适合大规模临床试验使用病人血清AQP4-IgG连续提交测试。先前的报道AQP4-IgG试验性能选择使用血清从历史档案情况下与一个NMOSD-compatible表示和控制与经典女士或脱髓鞘临床孤立综合征。这样的研究能证明高疾病特异性NMOSD和上级组织的敏感性NMO-IgG免疫荧光检测。5,8,- - - - - -,10,21研究结果证明假阳性结果的出现,尤其是M1-ELISA M23-FACS,提交nonselected患者血清中神经实践。

梅奥诊所的分析(组1)患者的血清证实了cba的高敏感性和特异性。5认为是假阳性结果中遇到6%的血清,但在95%的情况下只有1试验类型(最常见的活细胞(流式细胞仪)测定采用M23-AQP4-transfected细胞或M1-ELISA)。我们也报道广泛non-Mayo经验。3例,两组产生积极的结果超过1 CBA (M1-FACS、M23-FACS M1-CBA)被分类事后自身免疫性AQP4脑炎(1共存自身免疫性疾病和其他与乳腺癌和视神经chiasmitis)。脑炎是一种少见但承认AQP4-IgG NMOSD统一的积极表现,儿童比成人更常见。8,22,23乳腺腺癌是最常见的多种NMOSD伴奏。20.第三个病人(血清阳性M1-CBA和ELISA但负M1-FACS和M23-FACS)缺乏客观异常,尽管opticospinal症状。可想而知,这个血清包含非病原的免疫球蛋白g特定细胞内AQP4抗原决定基,无法在现场转染细胞。明确临床诊断,它是由额外的成本效益测试AQP4-IgG遇到一些疑似假阳性的检测结果。

ELISA检测容易干扰非特异性抗体绑定。24所有控制血清产生假阳性结果M23-FACS化验来自ANA-positive或hypergammaglobulinemic病人。观察让我们怀疑滥交绑定的免疫球蛋白高阶M23-AQP4数组,它赋予胶粘剂性质。25是认识到抗原特异结合的NMO-IgG M23-AQP4 M1-AQP4比NMO-IgG狂热的绑定26(由于高阶的抗原表位距离数组确保二价订婚的晶圆厂)。非特异性免疫球蛋白g优先约束的机制M23-AQP4是未知的。大型M23-AQP4阵列的微环境局部水分子可能促进非特异性免疫球蛋白通过增加氢键结合。27,28支持这一假设,我们发现non-NMOSD患者免疫球蛋白结合生活实例M23-AQP4细胞,但不是生活M1-AQP4细胞,和一个M1-AQP4剂量依赖性降低绑定到M1 / M23 cotransfected细胞。14,15,18

遇到的大量的潜在的假阳性结果反映了大量收购了在大规模临床实验室服务。在病例对照研究中,控制通常由年龄和性别匹配的病例1:1比例。相比之下,控制情况下比在我们的研究的组1是8:1。在临床实践中,神经学家通常秩序AQP4-IgG测试不同患者进行预测概率NMOSD诊断。之间存在反比关系患者的比例没有NMOSD测试组和阳性结果的比例确定为真阳性。因此,即使化验报告100%特异性研究群体中产生意外的积极的结果在临床服务。连续服务质量保证是至关重要的。

血清学检查患者疑似NMOSD AQP4-IgG艾滋病确认诊断。cba生活,尤其是那些使用M1-AQP4同种型抗原,在我们的经验最好的性能特征。

作者的贡献

弗莱尔先生:分析和解释数据,起草手稿。列侬博士:研究概念和设计,分析和解释数据,关键的修订手稿,研究监督。Pittock博士:数据的分析和解释,重要的修订手稿。詹金斯女士:统计分析,重要的修订手稿。Fallier-Becker博士:数据的分析和解释,重要的修订手稿。Clardy博士:数据的分析和解释。奥尔塔博士:数据的分析和解释。Jedynak先生:数据的分析和解释。Lucchinetti博士:数据的分析和解释。•舒斯特博士:数据的分析和解释。 Dr. Weinshenker: analysis and interpretation of data, critical revision of manuscript. Dr. Wingerchuk: analysis and interpretation of data, critical revision of manuscript. Dr. McKeon: study concept and design, analysis and interpretation of data, drafting of manuscript, critical revision of manuscript, study supervision.

研究资金

这项研究是由美国国立卫生研究院(NS065829)和Guthy-Jackson基础。

信息披露

摩根大通(J.P.莱尔报告没有披露。退役军人列侬收到版税有关AQP4抗体诊断技术的动;是一个名叫发明人申请专利,与功能性AQP4 / NMO-IgG化验和NMO-IgG作为癌症标记;和接收研究来自美国国立卫生研究院(NS065829)的支持。中华民国Pittock是一个名叫发明人申请专利,与功能性AQP4 / NMO-IgG化验和NMO-IgG作为癌症标记和接收来自国家卫生研究院研究支持(NS065829) Guthy-Jackson慈善基金会和Alexion制药,Inc .克里詹金斯,p . Fallier-Becker S.L. Clardy报告没有披露。e·奥尔塔已收到研究多发性硬化症国际基金会的支持。电子艺界Jedynak报告没有披露。多严峻Lucchinetti版税的股票从营销工具检测AQP4的自体抗体和出售蓝书的神经学:多发性硬化症3首页(桑德斯爱思唯尔,2010年);已收到旅行资助生原体Idec;和接收研究来自美国国立卫生研究院(RO1-NS49577)的支持,Guthy-Jackson慈善基金会和国家多发性硬化症协会(RG 3185 - b - 3)。电子艺界•舒斯特接收研究国家多发性硬化症协会的支持。人Weinshenker是诺华公司的数据安全监测委员会Idec,和三菱;是审判小组落实;已收到支付咨询从Elan制药、葛兰素史克制药、小野制药、和弦疗法,和Chugai药品;这篇社论是董事会的加拿大神经科学杂志》上,首页神经学、和土耳其的神经病学杂志首页;收到研究Guthy-Jackson慈善基金会的支持;收到RSR有限公司专利许可使用费有关AQP4-associated抗体对诊断neuromyelitis视;咨询了锐气,葛兰素史克,小野,透医疗公司,Chugai Alexion,和弦。D.M. Wingerchuk已收到研究基因泰克的支持,Genzyme, TerumoBCT,和国家多发性硬化症协会;曾担任顾问Chugai制药、Alexion,并落实公司。和编辑委员会目前的医学研究和意见和药物在上下文中。a .麦肯接收研究Guthy杰克逊慈善基金会的支持和落实公司去首页Neurology.org/nn为充分披露。

承认

作者感谢生产女士Knittel女士,优秀的技术支持。

脚注

  • 收到了2014年1月20日。
  • 接受的最终形式2014年3月31日。

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