文摘
摘要目的:开发一个敏感和具体试验检测与myelin-associated反应的循环IgM副蛋白糖蛋白(MAG)多神经病患者。
背景:这些镁活性IgM专门副蛋白绑定一个N-linked sulfoglucuronyl碳水化合物抗原决定基(HNK-1)也出现在其他神经糖蛋白等P0, N-CAM和鞘糖脂。在这里,我们报告的开发和验证一个间接免疫荧光试验(IFA)抗体的检测。
设计/方法:完整的人类MAG c端oligohistidine标签,野生型beta 1, 3-glucuronyltransferase 1 (GlcAT-P)惰性酶GlcAT-P [E284A],和HNK-1 sulfotransferase (HNK-1ST)表示单独或在HEK293细胞不同的组合。表达HNK-1抗原决定基随后分析了免疫印迹和IFA生活和固定细胞使用HNK-1特定的鼠单克隆抗体。随后,IFA使用HEK293-GlcAT-P细胞被用来屏幕HNK-1活性在血清IgM anti-MAG阳性病例的多神经病(n = 40), anti-NMDAR脑炎(n = 20)患者和健康献血者(n = 20)。
结果:观察HNK-1主题的表达生活和固定HEK293表达GlcAT-P而缺席在HEK293细胞中表达杂志,HNK-1ST和/或GlcAT-P E284A GlcAT-P缺席的。使用HEK293-GlcAT-P HNK-1 IgM反应被IFA检测细胞从所有anti-MAG患者血清IgM多神经病有关,但在所有的控件。所有血清-当测试使用GlcAT-P -细胞系。
结论:重组表达GlcAT-P足以使HEK293细胞合成HNK-1抗原决定基并整合HNK-1-bearing糖蛋白或糖脂质膜的外表面。这个策略提供了一个简单的方法来检测HNK-1活性IgM副蛋白具有高敏感性和特异性anti-MAG患者多神经病有关。
披露:呕吐博士已经收到个人活动与补偿EUROIMMUN AG)作为一个员工。Linington博士没有披露。格劳博士没有披露。萨瓦特博士没有披露。博士储料器没有披露。科莫罗夫斯基博士没有披露。Probst博士没有披露。
