摘要
目标比较3个国际中心的髓鞘少突胶质细胞糖蛋白免疫球蛋白G (IgG)细胞检测方法。
方法394例患者的血清样本如下:急性播散性脑脊髓炎(28例)，血清阴性视神经脊髓炎(27例)，视神经炎(21例单一，2例复发)和纵向广泛(10例单一，3例复发)。对照样本来自多发性硬化症(244)、高γ -球蛋白血症(42)和其他(17)患者。采用荧光显微镜(euroimmune固定CBA, Oxford活细胞CBA)或流式细胞术(Mayo活细胞荧光活化细胞分选法)目视观察血清阳性。
结果在任何方法阳性的25个样本中，21个在所有3项检测中都是一致的，2个在牛津和euroimmune均为阳性，2个仅在牛津呈阳性。euroimmune、Mayo和Oxford的结果如下:临床特异性为98.1%、99.6%和100%;阳性预测值(ppv)分别为82.1%、95.5%和100%;阴性预测值分别为79.0%、78.8%和79.8%。5例假阳性中，1例euroimmune和Mayo同时阳性，4例euroimmune单独阳性。
结论总体而言，在3种不同的MOG-IgG cba中观察到高度一致。两种基于活细胞的方法都比固定细胞测定法具有更好的ppv，这表明这些测定法的阳性结果是MOG自身免疫性谱系疾病更可靠的指标。
术语表
- 亚当=
- 急性播散性脑脊髓炎;
- AQP4=
- aquaporin-4;
- CBA=
- 细胞试验;
- 直接存储器存取=
- 疾病修饰剂;
- 国际国内直拨电话=
- 炎症性脱髓鞘疾病;
- 免疫球蛋白=
- 免疫球蛋白G;
- 国际金融协会=
- 间接免疫荧光法;
- MOG=
- 髓鞘少突胶质细胞糖蛋白;
- 女士=
- 多发性硬化症;
- 动=
- 视neuromyelitis;
- PPV=
- 阳性预测值
越来越多的证据表明，中枢神经系统炎症性脱髓鞘疾病(IDDs)，包括视神经脊髓炎(NMO)谱系障碍、急性播散性脑脊髓炎(ADEM)、视神经炎(复发性不止一次发作)和横断性脊髓炎，通常与靶向水通道蛋白-4 (AQP4)或髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)的免疫球蛋白G (IgG)有关。1，- - - - - -，5直到最近才被发现，患有这些疾病的患者通常被误诊为多发性硬化症(MS)，但当代研究结果表明，MS、MOG-IgG和aqp4 - igg相关的idd在临床、放射学、病理学和预后方面存在差异。5，6
mog - igg相关的idd在儿童中可能有更高的患病率，并且经常复发，通常表现为视神经炎。发作可能与累积的神经元损伤和功能损害有关。MOG-IgG可能是短暂的或持续的，其作为复发预测因子的作用仍然是正在进行的研究的焦点。由于缺乏任何特定疾病的相关性，MOG抗体作为一种生物标志物的历史一直不太确定，而使用基于细胞的测定(cba)的现代方法现在定义了一种自身免疫性少突胶质病变，对免疫抑制剂的反应优于对MS常用的疾病修饰剂(DMA)的反应。4，- - - - - -，8尽管尚未进行随机临床试验，但早期开始和长期服用这些药物可能会预防复发并减少残疾累积。MOG-IgG也提供重要的预后信息。因此，准确的血清学诊断是优化临床护理的必要条件。
该领域的主要意见领袖在2017年发表的一篇评论文章中指出，“检测MOG抗体的方法已经有了很大的改进，基于细胞的测定(cba)是最先进的。”1在这项盲法研究中，比较了来自3个国际中心的3种不同的MOG-IgG cba。
方法
标准方案批准，注册和患者同意
我们研究中的所有患者都同意将他们的医疗记录用于研究目的。该研究已获得梅奥诊所机构审查委员会批准(No. 08-007846)。
对394例患者和对照组的血清样本进行了检测:91例患者被分类为mog - igg样临床表型，包括ADEM(28例)、AQP4-IgG血清阴性NMO(27例，符合1999年或2006年的Wingerchuk NMO诊断标准[不包括抗体状态])、视神经炎(21例单一，2例复发)或纵向广泛的横向脊髓炎(10例单一，3例复发)。对照样本来自多发性硬化症(244例，选自奥姆斯特德县多发性硬化症人群队列)、高γ球蛋白血症(42例)和其他(17例，脑炎、胶质瘤、克雅氏病、青光眼)患者。敏感性计算为mog - igg样临床表型队列中阳性病例的百分比。特异性计算为MS队列中阳性病例和与mog相关临床表型不一致的其他神经系统症状患者的百分比。阳性预测值(PPV)计算为mog - igg样临床表型患者中阳性检测结果占所有阳性检测结果的百分比，并估计阳性检测结果的可靠性。相反，阴性预测值是指无mog - igg样临床表型的患者的阴性检测结果占所有阴性检测结果的百分比，是对阴性检测结果排除该疾病的可靠性的估计。这项研究得到了梅奥诊所机构审查委员会的批准。
所有样品保存在- 80°C的梅奥诊所中心实验室。它们被分成等份，并作为编码样本提供给3个神经免疫学实验室:梅奥诊所;英国牛津大学;以及德国的euroimmune。所有样本均由不了解临床信息的调查人员进行测试。三种检测方法见表1，并且所有3种检测认为是阳性和阴性的细胞的染色如图所示数字
牛津细胞法(CBA) (A.a)阴性和(A.b)阳性;euroimmune CBA (B.a)阴性和(B.b)阳性;Mayo荧光活化细胞分选试验(FACS) (C.a)阴性和(C.b)阳性结果。对于Mayo FACS检测，使用2个细胞群来获得中位荧光强度。绿色荧光蛋白(GFP)阴性群体代表未转染的细胞，绿色荧光蛋白阳性群体代表同时表达乙酰化GFP和髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)蛋白的细胞。AlexaFluor-647的中位强度是结合的人血清抗体的指标。如图(C.b)所示，阳性对照中，gfp阳性人群的AlexaFluor-647强度中位数为40,593,gfp阴性人群为477。阴性对照(C.a) gfp阳性种群的中位强度为162,gfp阴性种群的中位强度为147。这些统计值用于计算免疫球蛋白G (IgG)结合指数，该指数是gfp阳性值与gfp阴性值的比值。
数据可用性声明
本研究中使用和分析的数据集可应通讯作者的合理要求向其提供。
结果
在25例经任何方法检测呈阳性的样本中，21例3项检测结果一致，2例经牛津检测和euroimmune检测均呈阳性，2例仅经牛津检测呈阳性。
通过对244名MS患者和17名自身免疫性MOG谱外疾病患者的队列测量，临床特异性euroimmune为98.1%，Mayo为99.6%，Oxford为100%。相应的ppv分别为82.1%、95.5%和100%。阴性预测值分别为79.0%、78.8%和79.8%。在该队列的5例假阳性结果中，1例euroimmune和Mayo检测均为阳性(表2)。另外4例假阳性结果仅限于Euroimmun CBA。3种检测方法的分析特异性均较高;在42例高丙种球蛋白血症患者队列中未发现假阳性。本文对MOG-IgG检测多中心方法比较研究的结果进行了总结表2。所有两两比较都显示出良好的测定间可靠性，κ值>0.8表明不同方法之间的一致性很高(Cohen κ统计)。因此，尽管方法和测试位置不同，但大多数样本在不同平台上获得了相同的结果。这对于基于MOG-IgG的检测方法的初始部署至关重要，因为它为阳性结果的可靠性提供了信心，但也表明MOG-IgG抗体的检测是稳健的，这些检测方法本质上是标准化的。
讨论
两种基于活细胞的方法，在不同的中心进行不同的检测，都比固定检测具有更好的ppv，这表明这些检测的阳性结果是MOG谱系障碍更可靠的指标。ELISA不是检测MOG-IgG的可靠方法。mog - igg相关疾病可能受益于早期和持续的免疫治疗。通常，炎症性特发性中枢神经系统疾病(如ADEM、视神经炎和横脊髓炎)的治疗方法与急性情况下的胶质抗体(类固醇或血浆置换)相似。然而，对于维持性免疫治疗，没有神经胶质抗体的患者可能不太可能接受长期免疫抑制剂治疗，而较长的治疗方案与mog - igg相关疾病的复发较少相关。假阴性结果通常会导致MS的误诊和随后的DMAs治疗，有报道称DMAs会加重aqp4 - igg阳性idd，尽管有些对两种疾病都有效(抗cd20治疗)。目前缺乏DMAs加剧MOG-IgG疾病的数据。
诊断不准确的另一个令人担忧的后果是检测出假阳性结果。由于mog - igg在疑似脱髓鞘事件的临床评估中可能会被普遍使用，因此在临床诊断为MS的患者中出现假阳性结果可能导致选择免疫抑制剂(例如霉酚酸酯、cellcept)，而不是食品和药物管理局批准的DMA。在本研究中，27例商业试验阳性结果中有5例(18.5%)为对照样品，PPV相对较差(82.1% vs 95.5%-100%)。这种检测方法在常规诊断实验室更容易操作，但必须是固定的，以便运输和储存。固定可能产生隐表位，这可以解释明显的正结合。在AQP4测定比较中也描述了这些差异。未来的研究应该在他们的设计中解决这个问题，这可能有助于更好地理解这种差异。
研究资金
由梅奥诊所的多发性硬化症和自身免疫神经病学中心以及实验室医学和病理学部门提供资金。首页
信息披露
P. Waters和牛津大学持有在神经系统疾病中进行抗体检测的专利，并获得版税和收入。L. Komorowski是euroimmune AG公司的员工，该公司开发、生产和制造用于检测疾病相关抗体的免疫测定法。伍德霍尔没有披露与手稿有关的信息。S. Lederer是euroimmune AG公司的员工，该公司开发、生产和制造用于检测疾病相关抗体的免疫测定法。M. Majed, J. Fryer和J. Mills没有报告与手稿相关的披露。E. Flanagan作为Medimmune的现场首席研究员，在NMO谱系障碍的MEDI551研究中获得研究支持。伊朗和牛津大学拥有在神经系统疾病中进行抗体分析的专利，并获得版税和收入。答:Kunchok没有披露与手稿有关的信息。a . McKeon公司的MAP1B抗体作为神经系统自身免疫和副肿瘤疾病的标志物正在申请专利;为Grifols, Medimmune和euroimmune咨询; and received research support from Medimmune and Euroimmun but has not received personal compensation. S. Pittock holds patents that relate to functional AQP4/NMO-IgG assays and NMO-IgG as a cancer marker; has a patent pending for MPA1B antibody as a marker of neurologic autoimmunity and paraneoplastic disorders; consulted for Alexion and Medimmune; and received research support from Grifols, Medimmune, and Alexion. All compensation for consulting activities is paid directly to Mayo Clinic. Go to首页Neurology.org/N完整的信息披露。
附录的作者
脚注
↵*这些作者对这项工作贡献均等。
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文章处理费由惠康信托基金资助。
编辑、页面501
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- 收到了2018年5月31日。
- 接受最终形式2018年11月4日。
- ©2019作者。由威科集团代表美国神经病学学会出版。首页
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