文摘
摘要目的:比较不同的神经丝光(NfL)链蛋白质制剂在不同试验平台。
背景:NfL被认为是neuro-axonal损伤的生物标志物在神经系统疾病和一个可能的替代标记女士然而,大多数研究都是基于一个化验和彻底的比较测量技术是失踪。
设计/方法:我们使用以下NfL准备:从乌曼商用牛NfL诊断(Uman-NfL),商用重组人类从Origene NfL (Origene-NfL)和人类NfL表达大肠杆菌(hurec-NfL)。NfL ELISA检测了乌曼(诊断),免疫印迹,液体chromatography-tandem质谱(质/ MS)和单分子阵列(SIMOA)平台。NfL在适当的缓冲和稀释Origene-PC也上升到2在不同浓度血清(200、20、2和0.2 ng / mL)在SIMOA和测试。同样,血清样品浓度的30,3.3,0.37,和0.04 ng / mL ELISA检测。
结果:质/女士Origene NfL可以检测到但不Uman-NfL (hurec-NfL没有完成)。在ELISA Uman-NfL hurec-NfL返回预期的浓度,但Origene-NfL没有信号。在西方墨点法有NfL-specific乐队为Uman-NfL Origene-NfL和hurec-NfL但不。飙升的平均结果样本在SIMOA 10, 1.5, 0.15,和0.03 ng / mL,即8-20褶皱低于预期。ELISA结果飙升样本3.02,0.4,0.1,0.5和0.08 ng / mL,即比预期少-10倍。
结论:有一个显著的区别各种试验平台之间的NfL的检测。转译后的修改,如磷酸化、糖基化、硝化、氧化和ubiquitylation也许可以解释一些观察但不ELISA的事实是无法检测到纯Origine-NfL而发现如果上升到血清。这可能暗示强烈的基体效应或特异性问题分析试剂。对于跨平台的NfL试验验证需要进一步的研究。
披露:Deisenhammer博士已经收到个人赔偿咨询、担任科学顾问委员会说,与生原体或其他活动,Celgene公司,默克公司Genzyme诺华,罗氏。Deisenhammer博士接到生原体和Genzyme-Sanofi研究支持。Podlesnic博士没有披露。Kuhle博士的机构已收到赔偿咨询、担任科学顾问委员会说,与生原体或其他活动,诺华制药、Protagen AG,罗氏,Teva,赛诺菲安万特Genzyme,瑞士女士社会,和默克公司Serono,。Kuhle已收到博士研究ECTRIMS研究奖学金计划的支持,拜耳公司,生原体,赛诺菲安万特Genzyme,默克公司,诺华制药、罗氏、瑞士女士社会,瑞士国家研究基金会和巴塞尔大学。Leppert博士已经收到个人赔偿咨询、担任科学顾问委员会说,与诺华或其他活动。旧事已收到个人赔偿咨询博士担任科学顾问委员会说,或其他活动与诺华制药公司,瑞士巴塞尔。Deisenhammer博士没有披露。Schanda博士没有披露。艾莉博士已经收到个人赔偿咨询、担任科学顾问委员会说,与生原体或其他活动。 Dr. Reindl has received personal compensation for consulting, serving on a scientific advisory board, speaking, or other activities with Chugai.. Dr. Reindl has received research support from The Neurological Research Laboratory (Markus Reindl, Medical University of Innsbruck and Tirol Kliniken), Euroimmu.
